• صفحه اصلی
  • مرور
    • شماره جاری
    • بر اساس شماره‌های نشریه
    • بر اساس نویسندگان
    • بر اساس موضوعات
    • نمایه نویسندگان
    • نمایه کلیدواژه ها
  • اطلاعات نشریه
    • درباره نشریه
    • اهداف و چشم انداز
    • اعضای هیات تحریریه
    • اعضای مشورتی هیات تحریریه
    • همکاران دفتر نشریه
    • اصول اخلاقی انتشار مقاله
    • بانک ها و نمایه نامه ها
    • پیوندهای مفید
    • پرسش‌های متداول
    • فرایند پذیرش مقالات
    • اخبار و اعلانات
  • راهنمای نویسندگان
  • ارسال مقاله
  • داوران
  • تماس با ما
 
  • ورود به سامانه ▼
    • ورود به سامانه
    • ثبت نام در سامانه
  • English
صفحه اصلی فهرست مقالات مشخصات مقاله
  • ذخیره رکوردها
  • |
  • نسخه قابل چاپ
  • |
  • توصیه به دوستان
  • |
  • ارجاع به این مقاله ارجاع به مقاله
    RIS EndNote BibTeX APA MLA Harvard Vancouver
  • |
  • اشتراک گذاری اشتراک گذاری
    CiteULike Mendeley Facebook Google LinkedIn Twitter Telegram
پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی
مقالات آماده انتشار
شماره جاری
شماره‌های پیشین نشریه
دوره دوره 20 (1396)
دوره دوره 19 (1395)
دوره دوره 18 (1394)
دوره دوره 17 (1393)
دوره دوره 16 (1392)
دوره دوره 15 (1391)
شماره شماره 4 (1391)
شماره شماره 3 (1391)
شماره شماره 2 (1391)
شماره شماره 1 (1391)
دوره دوره 14 (1390)
دوره دوره 13 (1389)
دوره دوره 12 (1388)
دوره دوره 11 (1387)
دوره دوره 10 (1386)
دوره دوره 9 (1385)
دوره دوره 8 (1384)
صابری, فریده, سلمانیان, علی هاتف, امانی, جعفر, جعفری, محیات. (1391). تولید پروتئین دوگانه Tir-اینتیمین از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum) و بررسی ایمنی‏زایی آن در موش آزمایشگاهی. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی, 15(3), 23-36.
فریده صابری; علی هاتف سلمانیان; جعفر امانی; محیات جعفری. "تولید پروتئین دوگانه Tir-اینتیمین از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum) و بررسی ایمنی‏زایی آن در موش آزمایشگاهی". پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی, 15, 3, 1391, 23-36.
صابری, فریده, سلمانیان, علی هاتف, امانی, جعفر, جعفری, محیات. (1391). 'تولید پروتئین دوگانه Tir-اینتیمین از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum) و بررسی ایمنی‏زایی آن در موش آزمایشگاهی', پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی, 15(3), pp. 23-36.
صابری, فریده, سلمانیان, علی هاتف, امانی, جعفر, جعفری, محیات. تولید پروتئین دوگانه Tir-اینتیمین از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum) و بررسی ایمنی‏زایی آن در موش آزمایشگاهی. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی, 1391; 15(3): 23-36.

تولید پروتئین دوگانه Tir-اینتیمین از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum) و بررسی ایمنی‏زایی آن در موش آزمایشگاهی

مقاله 3، دوره 15، شماره 3، پاییز 1391، صفحه 23-36  XML اصل مقاله (1116 K)
نوع مقاله: مقاله پژوهشی
نویسندگان
فریده صابری1؛ علی هاتف سلمانیان 2؛ جعفر امانی3؛ محیات جعفری1
1کارشناس ارشد، گروه بیوتکنولوژی گیاهی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست‏فناوری، تهران، ایران
2دانشیار، گروه بیوتکنولوژی گیاهی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست‏فناوری، تهران، ایران
3استادیار، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران
چکیده
هدف: اشریشیا کلی سویه O157:H7 یکی از مهم‏ترین بیماری‏زاهای تولید کننده بیماری کولیت خونریزی دهنده در انسان است. دام‏های اهلی اصلی‏ترین مخزن این باکتری هستند. پروتئین‏های اینتیمین، Tir و EspA از مهم‏ترین عوامل بیماری‏زایی این باکتری محسوب می‏شوند. پروتئین EspA در ساخت کانال ارتباطی نقش داشته و مانند یک رابط سبب انتقال پروتئین Tir به سلول میزبان می‏شود و پروتئین اینتیمین که در غشای باکتری جای گرفته است با متصل شدن به پروتئین Tir به غشای میزبان منتقل و منشأ اصلی آن نیز باکتری مهاجم است، سبب اتصال محکم و اختصاصی باکتری به سلول میزبان می‏شود. این اتصال باعث ایجاد ضایعه تخریب دیواره سلول میزبان می‏شود. انجام تحقیق بر این اصل است که تولید دو عامل اصلی بیماری‏زایی که باعث اتصال باکتری به میزبان می‏شود به صورت دوگانه و تجویز آن به عنوان یک ایمنی‏زای خوراکی می‏تواند با تحریک مناسب سیستم ایمنی هومورال و به‏ویژه مخاطی میزبان مانع کلونیزاسیون باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در مدل حیوانی شود. مواد و روش‏ها: ابتدا به صورت تئوری یک سازه ژنی حاوی قسمت‏هایی از اینتیمین (I) و Tir (t) با استفاده از یک رابط جدا کننده پپتیدی به یکدیگر متصل و ژن آن به طور مصنوعی ساخته شد. این ژن مصنوعی براساس کدون‏های گیاه توتون بهینه‏سازی و سپس تحت کنترل پروموتر CaMV35S در ناقل بیانی گیاه کلون و پس از آن تراریختی و باز‏زایی گیاه توتون با آن انجام گرفت. سپس حیوان مدل با برگ‏های گیاه تراریخت تغذیه شد. نتایج: ایمن‏سازی حیوان با استفاده از بافت گیاه تراریخت حاوی این ایمنی‏زای دو‏گانه موجب تحریک و تولید IgG سرمی بر علیه باکتری فوق شد. نتیجه‏گیری: روش تغذیه و ایمن‏سازی با ایمنی‏زاهای خوراکی می‏تواند به عنوان یک ابزار مناسب برای ایجاد ایمنی و احتمالاً محافظت حیوانات در برابر حضور و بیماری‏زایی باکتری اشریشیا کلی O157:H7 عمل نماید.
کلیدواژه ها
واکسن خوراکی؛ اشریشیا کلی O157:H7؛ اینتیمین؛ Tir
موضوعات
بیوتکنولوژی مولکولی؛ واکسن های نوترکیب
عنوان مقاله [English]
Production of Chimeric Tir-intimin Protein from E. coli O157:H7 in the Tobacco (Nicotiana tobbacum) Plant and its Immunological Evaluation in an Animal Model
نویسندگان [English]
Farideh Saberi1؛ Ali Hatef Salmanian2؛ Jafar Amani3؛ Mahyat Jafari1
1M.Sc., Department of Plant Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran
2Associated Professor, Department of Plant Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran
3Assistant Professor, Applied Microbiology Research Center, Baqiyatallah Medical Science University, Tehran, Iran
چکیده [English]
Objective: Escherichia coli (E.coli) O157:H7 is one of the most important pathogenic causes of hemorrhagic colitis in humans. Cattle are the main reservoirs of this bacteria and vaccination is a key mechanism for its control. The intimin, translocated intimin receptor (tir), and EspA proteins are virulence factors expressed by the LEE locus of enterohemorrhagic E. coli. EspA protein is a member of the type III secretion system (TTSS) needle complexes that delivers the tir protein into the host cell. Surface arrayed intimin docks the bacterium to the translocated intimin receptor (Tir). This intimate linkage is the starting point for attachment and effacing lesions. We hypothesize that the chimeric recombinant forms of two of these three effectors, as edible-based immunogens, would reduce colonization of E. coli O157:H7 in the mice model. Methods: We constructed a synthetic gene (it) composed of eae (i) and tir (t) attached together by a peptide linker. The synthetic gene (it) was codon optimized based on the tobacco (Nicotiana tobbacum) plant and cloned into plant expression vectors adjacent to CaMV35S promoters for expression in transgenic tobacco plants. The antigen produced in this plant was orally fed to mice. Results: Immunization of the mice model by the transgenic plant that contained the divalent immunogen showed the presence of IgG antibodies against E. coli O157:H7. Conclusion: This method could be an effective tool for protecting against E. coli O157:H7 hemorrhagic colitis.
کلیدواژه ها [English]
Escherichia coli O157:H7, Edible vaccine, Intimin, Tir
مراجع
1
 

 

[1]     Stevens MP, van Diemen PM, Dziva F, Jones PW, Wallis TS. Options for the control of enterohaemorrhagic Escherichia coli in ruminants. Microbiology 2002; 148(Pt 12): 3767-78.

[2]     Murphy M, Buckley JF, Whyte P, O'Mahony M, Anderson W, Wall PG, Fanning S. Surveillance of dairy production holdings supplying raw milk to the farmhouse cheese sector for Escherichia coli O157, O26 and O111. Zoonoses Public Health 2007; 54(9-10): 358-65.

[3]     Aslani MM, Bouzari S. An epidemiological study on Verotoxin-producing Escherichia coli (VTEC) infection among population of northern region of Iran (Mazandaran and Golestan provinces). Eur J Epidemiol 2003; 18(4): 345-9.

[4]     Shekarforoush S, Tahamtan Y, Pourbakhsh A. Detection and frequency of Stx2 gene in Escherichia coli O157 and O157:H7 strains isolated from sheep carcasses in Shiraz-Iran. Pak J Biol Sci 2008; 11(8): 1085-92.

[5]     Potter AA, Klashinsky S, Li Y, Frey E, Townsend H, Rogan D, Erickson G, Hinkley S, Klopfenstein T, Moxley RA, Smith DR, Finlay BB. Decreased shedding of Escherichia coli O157:H7 by cattle following vaccination with type III secreted proteins. Vaccine 2004; 22(3-4): 362-9.

[6]     Allen KJ, Rogan D, Finlay BB, Potter AA, Asper DJ. Vaccination with type III secreted proteins leads to decreased shedding in calves after experimental infection with Escherichia coli O157. Can J Vet Res 2011; 75(2): 98-105.

[7]     Oliveira AF, Cardoso SA, Almeida FB, de Oliveira LL, Pitondo-Silva A, Soares SG, Hanna ES. Oral immunization with attenuated Salmonella vaccine expressing Escherichia coli O157:H7 intimin gamma triggers both systemic and mucosal humoral immunity in mice. Microbiol Immunol 2012; 56(8): 513-22.

[8]     McNeilly TN, Mitchell MC, Rosser T, McAteer S, Low JC, Smith DG, Huntley JF, Mahajan A, Gally DL. Immunization of cattle with a combination of purified intimin-531, EspA and Tir significantly reduces shedding of Escherichia coli O157:H7 following oral challenge. Vaccine 2010; 28(5): 1422-8.

[9]     Kühne SA, Hawes WS, La Ragione RM, Woodward MJ, Whitelam GC, Gough KC. Isolation of recombinant antibodies against EspA and intimin of Escherichia coli O157:H7. J Clin Microbiol 2004; 42(7): 2966-76.

[10]  McNeilly TN, Mitchell MC, Nisbet AJ, McAteer S, Erridge C, Inglis NF, Smith DG, Low JC, Gally DL, Huntley JF, Mahajan A. IgA and IgG antibody responses following systemic immunization of cattle with native H7 flagellin differ in epitope recognition and capacity to neutralise TLR5 signalling. Vaccine 2010; 28(5): 1412-21.

[11]  Lal P, Ramachandran VG, Goyal R, Sharma R. Edible vaccines: current status and future. Indian J Med Microbiol 2007; 25(2): 93-102.

[12]  Judge NA, Mason HS, O'Brien AD. Plant cell-based intimin vaccine given orally to mice primed with intimin reduces time of Escherichia coli O157:H7 shedding in feces. Infect Immun 2004; 72(1): 168-75.

[13]  Amani J, Mousavi SL, Rafati S, Salmanian AH. Immunogenicity of a plant-derived edible chimeric EspA, Intimin and Tir of Escherichia coli O157:H7 in mice. Plant Sci 2011; 180(4): 620-7.

[14]  Russel D, Sambrook J. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2004; 1.31, 1.35, 1.84, 1.103-5.4, 5.18, 5.29.

[15]  Kang TJ, Han SC, Jang MO, Kang KH, Jang YS, Yang MS. Enhanced expression of B-subunit of Escherichia coli heat-labile enterotoxin in tobacco by optimization of coding sequence. Appl Biochem Biotechnol 2004; 117(3): 175-87.

[16]  Amani J, Kazemi R, Abbasi A, Salmanian AH. A simple and rapid leaf genomic DNA extraction method for polymerase chain reaction analysis. Iran J Biotechnol 2011; 9(1): 69-71.

[17]  Amani J, Salmanian AH, Rafati S, Mousavi SL. Immunogenic properties of chimeric protein from espA, eae and tir genes of Escherichia coli O157:H7. Vaccine 2010; 28(42): 6923-9.

[18]  Fan HY, Wang L, Luo J, Long BG. Protection against Escherichia coli O157:H7 challenge by immunization of mice with purified Tir proteins. Mol Biol Rep 2012; 39(2): 989-97.

[19]  Yekta MA, Goddeeris BM, Vanrompay D, Cox E. Immunization of sheep with a combination of intiminγ, EspA and EspB decreases Escherichia coli O157:H7 shedding. Vet Immunol Immunopathol 2011; 140(1-2): 42-6.

[20]  Gu J, Ning Y, Wang H, Xiao D, Tang B, Luo P, Cheng Y, Jiang M, Li N, Zou Q, Mao X. Vaccination of attenuated EIS-producing Salmonella induces protective immunity against enterohemorrhagic Escherichia coli in mice. Vaccine 2011; 29(43): 7395-403.

[21]  Rao AQ, Bakhsh A, Kiani S, Shahzad K, Shahid AA, Husnain T, Riazuddin S. The myth of plant transformation. Biotechnol Adv 2009; 27(6): 753-63.

[22]  Ghiasi SM, Salmanian AH, Chinikar S, Zakeri S. Mice orally immunized with a transgenic plant expressing the glycoprotein of Crimean-Congo hemorrhagic fever virus. Clin Vaccine Immunol 2011; 18(12): 2031-7.

[23]  Tiwari S, Verma PC, Singh PK, Tuli R. Plants as bioreactors for the production of vaccine antigens. Biotechnol Adv 2009; 27(4): 449-67.

آمار
تعداد مشاهده مقاله: 2,787
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,938
صفحه اصلی | واژه نامه اختصاصی | اخبار و اعلانات | اهداف و چشم انداز | نقشه سایت
ابتدای صفحه ابتدای صفحه

نقل مطالب این سایت با ذکر مأخذ بلامانع است.

Journal Management System. Designed by sinaweb.